Чувствительность к антибактериальным препаратам

Анализ на чувствительность к антибиотикам является обязательным при возникновении у врача подозрений, что заболевание пациента имеет бактериальную природу. Это связано с тем, что медики пытаются контролировать назначение данных препаратов, чтобы не стимулировать мутации и не вызывать резистентность у микроорганизмов.

Определение

Анализ на чувствительность к антибиотикам – это лабораторный способ выявления препарата, который будет оказывать наибольшее действие на патогенную флору в данном конкретном случае болезни.

На данный момент антибактериальная терапия применяется достаточно широко там, где она нужна, а также в тех случаях, когда это совсем не обязательно, для перестраховки от возможных осложнений. Например, после кесарева сечения, лапароскопических операций, удаления конкрементов из почек или мочеточников и т. д.

Фармацевтическая промышленность может предложить широкий выбор препаратов как в плане цены, так и в плане действенности. Для того чтобы не «тыкать пальцем в небо» и назначить эффективный антибиотик, нужно провести посевы на чувствительность.

Показания

Перед тем как врач подберет терапию, пациенту необходимо сдать некоторые анализы. Посев на чувствительность к антибиотикам назначается, если необходимо определить лекарство, которое в данном случае будет наиболее уместно. Чаще всего это исследование назначается для лечения заболеваний, передающихся половым путем, или ЗППП. Для детей же необходимость в определении антибиотика – это обязательное условие.

Кроме того, определение чувствительности нужно, чтобы избежать устойчивости бактерий к лечению. Если пациента недавно лечили антибиотиками, и теперь вновь необходим повторный курс, то требуется замена препарата. Это позволит использовать меньшие дозы лекарства и не вызывать мутации у возбудителя. В гнойных хирургических отделениях антибиотики меняют каждые два-три месяца.

Данный анализ необходим еще в том случае, если на основную группу антибиотиков у больного возникает аллергическая реакция.

Диффузионные методы

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал. Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста». Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.

Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком. После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги. Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.

Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.

Методы разведения

Анализ на флору и чувствительность к антибиотикам можно провести и другим способом. Этот метод основан на последовательном уменьшении концентрации антибиотика (от максимальной до минимальной) с целью определить, в какой из пробирок прекратится сдерживание роста бактерий.

Сначала подготавливают растворы препарата. Затем их вносят в жидкую среду с бактериями (бульон или агар). Все пробирки на ночь (то есть 12 часов) помещаются в термостат при температуре 37 градусов, а утром проводят анализ получившихся результатов. Если содержимое пробирки или чашки Петри мутное, это свидетельствует о росте бактерий и, следовательно, неэффективности антибиотика в данной концентрации. Первая пробирка, в которой визуально не будет определяться рост колоний микроорганизмов, будет считаться достаточной концентрацией для лечения.

Это разведение препарата принято называть минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Она измеряется в миллиграммах на литр или микрограммах на миллилитр.

Интерпретация результатов

Анализ на чувствительность к антибиотикам нужно уметь не только правильно сделать, но и грамотно расшифровать. Основываясь на получаемых результатах, все микроорганизмы делят на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для того чтобы различать их между собой, используются условные пограничные концентрации препаратов.

Эти значения не являются постоянными и могут изменяться в зависимости от приспосабливаемости микроорганизмов. Разработкой и пересмотром этих критериев поручено заниматься химиотерапевтам и микробиологам. Одной из официальных структур такого рода является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США. Разработанные ими стандарты признаны во всем мире для использования в оценке активности антибиотиков, в том числе для рандоминизированных многоцентровых исследований.

Различают два подхода к оценке результатов анализа на чувствительность к антибиотикам: клинический и микробиологический. Микробиологическая оценка ориентируется на распределение эффективных концентраций антибиотика, а клиническая – на качество антибактериальной терапии.

Резистентные и чувствительные микроорганизмы

Анализ – определение чувствительности антибиотикам – назначается с целью выявить чувствительные и устойчивые микроорганизмы.

Чувствительными называются возбудители, которые поддаются лечению антибиотиками в средней терапевтической концентрации. Если достоверная информация о категории чувствительности микроорганизма отсутствует, то учитываются данные, полученные в условиях лаборатории. Они совмещаются со знаниями о фармакокинетике используемого препарата, и после синтеза данной информации делается вывод о восприимчивости бактерий к лекарству.

К резистентным, то есть устойчивым, микроорганизмам относятся те бактерии, которые продолжают вызывать заболевания даже при использовании максимальных концентраций лекарственных веществ.

Читайте также:  Вульвит и вагинит

Промежуточную резистентность устанавливают в том случае, если заболевание в процессе лечения может иметь несколько исходов. Выздоровление пациента возможно в случае использования высоких доз антибиотиков либо в случае прицельного накапливания лекарства в месте инфекции.

Минимальная бактерицидная концентрация

Анализ на микрофлору и чувствительность к антибиотикам определяет такой показатель, как минимальная бактерицидная концентрация, или МБК. Это самая низкая концентрация препарата, которая в лабораторных условиях вызывает элиминацию практически всех микроорганизмов в течение двенадцати часов.

Знание этого показателя врачи используют, когда назначают терапию не бактерицидными, а бактериостатическими лекарственными средствами. Или в случаях, когда стандартная антибактериальная терапия оказывается неэффективной. Чаще всего этот анализ заказывают для больных с бактериальным эндокардитом, остеомиелитом, а также при оппортунистических инфекциях.

Что может быть образцом?

Анализ на чувствительность к антибиотикам может проводиться с использованием биологических жидкостей:

Кроме того, для определения местной чувствительности производят забор мазков из уретры, цервикального канала и верхних дыхательных путей.

Подготовка к анализам

Бак. анализ на чувствительность к антибиотикам не требует от пациентов существенной подготовки, но некоторые ограничения все-таки есть.

  1. Для исследования используется средняя порция утренней мочи, которая собирается в стерильную посуду. Перед этим пациент обязательно должен осуществить туалет наружных половых органов и рук.
  2. Грудное молоко собирается перед кормлением ребенка. Первая порция сливается, а затем в стерильный контейнер сцеживается несколько миллилитров с каждой груди.
  3. Перед сдачей мазка из носоглотки стоит воздержаться от приема пищи в течение пяти-шести часов.
  4. В случае взятия мазка из половых путей, рекомендуют воздерживаться от половых контактов в течение пары дней.

На сегодняшний день не существует клинических или лабораторных методов, которые бы со стопроцентной вероятностью могли предсказать эффект от антибактериальной терапии. Но в то же время определение чувствительности бактерий к лекарственным веществам может быть ориентиром для врачей в вопросах выбора и коррекции лечения.

Определение чувствительности бактерий – важная часть лечения бактериальных инфекций, поскольку эта процедура позволяет подобрать для лечения максимально эффективные антибиотики или бактериофаги. Так можно выяснить, на какие вещества колонии бактерий, выращенные in vitro, реагируют приостановкой роста или гибелью.

Родственные виды бактерий имеют некоторый естественный диапазон чувствительности к антибактериальным препаратам или их группам. Большинство бактериальных клеток имеют среднестатистическую чувствительность, характеризующую колонию. Однако при длительном выращивании на средах, содержащих вещества, подавляющие рост и развитие бактериальных колоний, чувствительность некоторых бактерий на антибиотики снижается, а со временем при помощи маленьких кольцевых ДНК (плазмид) передается всем бактериальным клеткам. Так возникают нечувствительные штаммы, доставляющие массу хлопот лечащим врачам.

Снижение чувствительности бактерий к антибактериальным препаратам часто возникает при длительном нерегулярном приеме антибиотиков. В таком случае определение чувствительности бактерий на антибиотики становится обязательным этапом, предшествующим эффективному лечению.

Современные бактериальные культуры часто демонстрируют высокую устойчивость к бета-лактамным антибиотикам, таким как цефалоспорины и пенициллины. Это связано с тем, что такие бактерии, как Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa способны синтезировать специальные ферменты, названные бета-лактамазами расширенного спектра (БЛРС).

Различают два способа назначения антибиотиков и фагов:

  1. Эмпирическое опирается на информацию о естественной чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам или бактериофагам, на данные эпидемиологов и имеющиеся данные предварительных клинических исследований.
  2. Этиотропное основано на информации о реальной чувствительности культур, полученных из инфекционных очагов к антибактериальным препаратам, которые планируется назначать для лечения.

Варианты взаимодействия бактерий и лекарственных препаратов

Понятие чувствительности бактерий к антибактериальным препаратам у микробиологов и врачей несколько различны. Это связано с тем, что концентрации веществ, допустимые при исследовании высеянных культур, могут существенно превышать те, которые допустимы для живых организмов. Различают три вида чувствительности бактерий к антибактериальным препаратам:

  1. Чувствительные. Реагируют прекращением роста на стандартные дозы лекарственных веществ.
  2. Устойчивые, или резистентные. Не реагируют даже на максимальные дозы лекарственных веществ.
  3. С промежуточной резистентностью к лекарственным препаратам. Иногда такие штаммы относят у устойчивым. Их особенностью является способность прекращать рост в тех частях организма, где происходит накапливание лекарственных веществ, и не реагировать на антибиотики в других частях организма. Некоторые из таких штаммов приостанавливают рост только при применении максимально допустимых концентраций антибиотика.

Важной характеристикой антибиотика является так называемая минимальная бактерицидная концентрация. Это такая концентрация, которая способна в течение определенного времени уменьшить численность бактерий в колонии на 99,9%. Ее применяют в особых случаях – у больных остеомиелитом, бактериальным эндокардитом, при генерализованных инфекциях, возникающих у больных с пониженным иммунитетом.

Методы определения

Определение чувствительности бактериальных культур к лекарственным препаратам может проводиться как в жидких, так и в плотных средах. Чаще других применяются три метода.

Диско-диффузионный

Для его проведения используются диски, смоченные растворами антибиотиков стандартных концентраций (выбираются заранее известные средние терапевтические дозы). Они подбираются так, чтобы размеры участков замедления роста бактерий находились в соответствии с принятыми международными стандартами.

Выращивание бактерий проводится на твердых средах (агар Мюллер-Хинтона или АГВ). На них высевается взвесь бактерий, а затем кладутся бумажные диски, смоченные разными антибактериальными агентами. После этого чашки выдерживаются в термостате. Определение чувствительности выполняют визуально, по наличию зон замедления роста около дисков. Измеряют их диаметры и по таблицам рассчитывают степень чувствительности бактериальной культуры к конкретным антибактериальным препаратам. Данный метод неприменим к веществам, плохо проникающим в толщу агара (полимиксину, ристомицину) и не позволяет провести определение минимальной подавляющей дозы антибиотика.

Метод последовательных разведений

Состоит в подготовке питательных сред, содержащих различное количество антибиотика. Их разливают в разные чашки Петри, каждую из которых снаружи разделяют на сектора при помощи маркера. На каждый сектор наносят разные культуры при помощи специальной петли или аппликатора. В каждую чашку можно за один раз посеять 10-15 культур. Чашки культивируют в термостате. Контрольную чашку заливают агаром без антибиотика.

Читайте также:  Тонус матки при беременности симптомы 1 триместр

Определение чувствительности этим методом дает возможность выявить минимальные количества антибиотика, полностью подавляющие рост бактерий.

Комбинированный, или метод Е-тестов

Определение чувствительности при помощи полосок бумаги с градиентом концентраций. Полоски размещают на чашке Петри равномерно и по степени подавления роста в разных участках определяют не только чувствительность культуры к препаратам, но и их минимальные концентрации, вызывающие появление характерных эллипсоидных зон задержки роста.

Существуют стандартные наборы антибиотиков, предназначенные для работы с грамположительными и грамотрицательными бактериями, а также расширенные наборы для исследования мочи, в состав которых входят дополнительные вещества – уросептики.

Бактериофаги и лечение бактериальных инфекций

Препараты-бактериофаги – вирусы, поражающие бактериальные клетки, – часто дополняют антибиотикотерапию. Они обладают необходимой специфичностью и вызывают лизис (растворение) бактериальных клеток-мишеней. Чувствительность бактериальных культур к фагам очень сильно варьирует, поэтому ее определение является залогом эффективной фаготерапии.

Вопрос природы чувствительности бактерий к бактериофагу давно интересовал биологов различных направлений. Существовала версия, что появление нечувствительных клеток происходит только после контакта колонии с фагами (так называемая ламарковская версия). Другая версия, дарвиновская, предполагала, что появление фагов модулирует численность колонии, давая преимущество предсуществовавшим клеткам со случайными мутациями, устойчивым к бактериофагам.

Разновидности фагов

Различают две группы бактериофагов в зависимости от скорости уничтожения бактериальных колоний.

Умеренные

Уничтожают только некоторые бактериальные клетки, вступая с выжившими в своеобразный симбиоз. ДНК такого бактериофага встраивается в ДНК бактерии (так называемый профаг) и передается будущим бактериальным поколениям. Такие культуры бактерий называют лизогенными – в определенный момент они дают жизнь новым свободным бактериофагам, которые переходят из нуклеоида в цитоплазму и способны лизировать бактерии соседних колоний. При этом чувствительность к бактериофагу у лизогенной колонии отсутствует.

Вирулентные

Лизируют все бактериальные клетки, давая жизнь новым фагам, которые уничтожают колонию в течение 30-40 минут, после чего частично гибнут, а частично инкапсулируются и переходят в спящее состояние.

Как определяют чувствительность к фагам

Определение чувствительности бактериальных культур к бактериофагам проводят при помощи микробиологических методов – на твердых или полужидких питательных средах. Обычно используют один моновалентный и два поливалентных фага.

Определение чувствительности колоний к бактериофагу может использоваться для различных целей:

  1. Фаготипирование. Определение штаммов бактерий по их чувствительности к фагам. Используется при проведении эпидемиологических исследований.
  2. Фагоидентификация. Определение видов бактерий по их отношению к фагам.
  3. Фагодиагностика. Выделение фагов из организма пациента, свидетельствующее о наличии соответствующих бактерий.
  4. Фагопрофилактика. Применяется при опасности заражения дизентерией. Чувствительность возбудителей к фагам позволяет проводить эффективную профилактику в очагах этого заболевания.
  5. Фаготерапия. Наиболее часто применяется для лечения заболеваний, вызванных стафилококком, шигеллами, протеем.

Применение бактериофагов показано только в случае, если выполнено определение чувствительности к бактериофагу, иначе этот дорогостоящий метод может не дать ожидаемого эффекта. Такие препараты используют для лечения инфекций у новорожденных, гнойных ран, а также инфекций мочевыводящей системы – уретритов, пиелонефритов, циститов.

Работаю врачом ветеринарной медицины. Увлекаюсь бальными танцами, спортом и йогой. В приоритет ставлю личностное развитие и освоение духовных практик. Любимые темы: ветеринария, биология, строительство, ремонт, путешествия. Табу: юриспруденция, политика, IT-технологии и компьютерные игры.

Нарушения функционирования системы мочеиспускания в первую очередь могут быть следствием развития инфекции в организме. В большинстве случаев точная диагностика заболеваний при осмотре невозможна, и требуется проведение лабораторных анализов.

Один из надежных способов определения возбудителей болезни – это посев на флору мочи. Доктор на основании первичных данных решает, в каких случаях назначать данное исследование. По результатам того, что показывает анализ мочи, ставится окончательный диагноз, и назначаются лекарственные препараты.

Суть бактериологического посева

Назначая анализ мочи на флору и чувствительность к антибиотикам, врач рассчитывает получить результат полноценного обследования, которое подтвердит или опровергнет поставленный диагноз и позволит определиться с курсом лечения и выбором группы антибиотиков.

Анализ мочи на стерильность заключается в том, что сданный материал предварительно отправляют в центрифугу, которая способствует выделению из жидкости характерного осадка.

Полученный осадок в лаборатории помещают в чашки Петри или другую стерильную посуду, разбавляя до слегка жидкого состояния, что позволяет полностью очистить полученный материал.

Затем материал переносят в новую посуду в среду из агар-агара или аналогичного питательного вещества, в котором происходит процесс размножения или выращивания бактерий, присутствующих в моче. Чтобы более наглядно наблюдать процессы роста, проводят окрашивание материала и помещают под микроскоп.

При исследовании мочи на флору изучается внешний вид, форма и другие особенности колонии микроорганизмов. Единицей измерения результата принято считать одну живую микробную клетку (КОЕ).

По внешним особенностям определяется вид микробов, например, стрептококки, стафилококки, сальмонеллы, эшерихии, грибы, бактерия Моргана, энтерококки и другие виды возбудителей заболеваний. Такие исследования позволяют сделать вывод о путях заражения и возможном дальнейшем развитии заболевания.

Врача интересует не только наличие микробов, но и их количество в 1 мл мочи. По их концентрации определяют достоверность анализа и интенсивность воспалительного процесса.

Если производится исследование на чувствительность возбудителя к определенному антибиотику, то анализ называется антибиотикограммой.

Показания к проведению

Анализ мочи на флору назначается по различным показаниям, в том числе при диагностике таких заболеваний в почках и мочевыводящих путях, как уретрит, цистит, пиелонефрит, туберкулез почек и так далее. Болевые ощущения в поясничной области – также повод для проведения диагностики.

Если постановка диагноза затруднена, то направление на анализ выдается при:

  • резях во время мочеиспускания;
  • появлении крови или других включений в моче или ее осадке;
  • врожденных или приобретенных патологиях почек и мочеполовой системы;
  • нарушениях частоты мочеиспусканий и количества отделяемой мочи (частое или редкое, обильное или недостаточное);
  • выявленных отклонениях по результатам анализа по Нечипоренко;
  • возникновении рецидива заболевания.
Читайте также:  Омега 3 при мастопатии

Посев мочи необходим, если проводимый курс лечения не дает должного эффекта и необходимо назначить новые препараты.

Во всех перечисленных случаях посев мочи на микрофлору позволяет выявить болезнь на ранней стадии и начать соответствующее лечение.

Также назначают анализ на начальной стадии беременности и при достижении срока 36 недель.

При любых заболеваниях мочеполовых путей анализ мочи на микроорганизмы производится до назначения антибиотиков, в перерыве между приемом или для замены одних препаратов другими, если назначенное при заболевании лечение неэффективно.

Посев мочи отличается высокой достоверностью результатов и позволяет точно поставить диагноз. На его основе определяют чувствительность болезнетворных микроорганизмов к определенным группам антибиотиков, что позволяет назначить наиболее эффективный курс лечения и избежать негативных последствий от приема несоответствующих препаратов.

Недостаток данного анализа – длительные сроки проведения (до 10 дней). На это время откладывается начало лечения или за 10 дней со дня анализа резко меняется картина заболевания. Пациент может выздороветь или заболеть другой болезнью.

Из-за сложности проведения и длительного ожидания результатов такой анализ назначается после проведения других исследований, если они не дали необходимой картины заболевания и не позволили провести окончательную диагностику.

Как подготовиться к исследованию

Анализ мочи на флору иногда дает неточные результаты. В большинстве случаев это связано с неправильной подготовкой пациента к проведению обследования. Посев мочи с определением возбудителя и его чувствительности к антибиотикам дает достоверный результат в 90% анализов у женщин и в 99% у мужчин.

К бакпосеву мочи пригоден только чистый материал, не содержащий посторонних включений. Поэтому перед сбором мочи необходимо позаботиться о чистоте мочевыводящих органов, т. е. вымыться без использования моющих средств.

Не допускается на анализы моча, собранная во время менструаций, так как невозможно обеспечить ее стерильность.

Как сдавать мочу на бакпосев

Анализ мочи на микрофлору требует внимательного отношения, начиная со сбора материала.

Сдавать анализ мочи необходимо в стерильную тару. Для этого в аптеках продаются специальные мочеприемники для взрослых и детей. Чтобы взять анализ мочи на бакпосев у новорожденных, используют разные мочеприемники для мальчиков и девочек.

Существуют специальные правила, как сдавать посев мочи на флору:

  • собирать мочу необходимо рано утром, до первого приема пищи;
  • после наполнения баночку сразу плотно закрывают закручивающейся крышкой, чтобы не допустить попадания посторонних веществ;
  • количество материала, достаточное для проведения анализа, — около 10 мл;
  • в течение двух часов с момента сбора материал должен поступить в лабораторию, где проводятся анализы. Если это невозможно, то посуда с мочой может до 6 часов храниться в холодильнике;
  • сдающим необходимо сопроводить материал направлением от врача, в котором указывается назначение анализа.

Внутри мочевого пузыря моча является стерильной, и загрязнение возможно только во время прохождения через наружные мочевыводящие органы.

Поскольку материал должен быть стерильным, чтобы избежать малейшего загрязнения, первую урину во время мочеиспускания направляют в унитаз, а средняя порция жидкости должна попасть в стерильную посуду.

При сборе урины необходимо за некоторое время до этого (до 2 недель) прекратить прием антибиотиков, а накануне не есть продукты, имеющие красящий эффект (свеклу, гранат). Накануне не разрешается проводить спринцевание.

В некоторых случаях урина сдается несколько дней подряд, например, для диагностики туберкулеза материал сдается в течение 3 суток.

Сотрудник лаборатории, принимающий материал на анализ, может уточнить, в какое время был проведен сбор, что ел и какие препараты принимал пациент и предполагаемый диагноз.

Расшифровка результатов анализа

После сдачи анализа мочи на посев расшифровка проводится только лечащим врачом.

В результате анализа указывается количество конкретных бактерий в 1 мл урины. Если показатель составляет свыше 100000 на 1 мл, то возбудитель данного вида является причиной заболевания.

  • показатели от 10 до 100 – случайное заражение;
  • 1000 – организм здоров, и воспалительные процессы отсутствуют;
  • 10000 – ошибка в ходе проведения анализа;
  • 100000 и выше – диагностируется заболевание.

При наличии разных возбудителей их количество также измеряется в КОЕ. Возможны следующие варианты результатов:

  • меньше 1000 КОЕ в 1 мл – это норма, и зафиксировано случайное попадание бактерий при общем положительном результате;
  • от 1000 до 100 000 КОЕ – ошибки в ходе проведения анализа, в результате чего требуется повторная сдача анализов;
  • свыше 100000 — выявленный возбудитель, провоцирующий инфекцию в почках.

Кроме цифровых показателей, используются буквенные обозначения:

  • R – микроорганизм нечувствителен к конкретному антибиотику;
  • S – возбудители заболевания перестают размножаться под действием лекарственного препарата.

Достоверность результатов

Результаты бактериологического исследования мочи отличаются высокой достоверностью и информативностью, если соблюдаются правила сбора и обработки материала.

На точность результатов исследования влияют следующие факторы:

  • стерильность используемой посуды;
  • соблюдение правил сбора мочи;
  • сроки сдачи материала для анализа;
  • достаточная квалификация и аккуратность персонала лаборатории.

Пациенту придется еще раз сдавать анализы, если:

  • нарушены условия сбора;
  • анализы сданы во время приема лекарственных препаратов;
  • моча имеет нехарактерный цвет из-за неразрешенной пищи или менструации.

В заключение

Посев мочи на флору и чувствительность возбудителей заболевания к антибиотикам поможет врачу выявить наличие болезнетворных микроорганизмов, поставить диагноз с высокой степенью точности и назначить нужные препараты.

Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!:

Adblock detector