Точность анализа ифа

Инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека, – серьезный диагноз. Ошибки при диагностике могут привести к плачевным последствиям. Анализ ИФА на ВИЧ – наиболее доступный метод исследования, но не во всех случаях он информативен.

Что такое ИФА

ИФА – иммуноферментный анализ. Задача метода ИФА – выявление антител к вирусу иммунодефицита в биологическом материале. С помощью метода можно отследить присутствие в жидкости не самих вирусов, но только антител, вырабатывающихся в ответ на их присутствие. Иммуноферментный анализ широко используется при диагностике ЗППП. Он помогает выявить ВИЧ и другие инфекции, передающиеся половым путем.

Существует несколько видов ИФА: прямой вариант, косвенный вариант, метод «сэндвича». В любом случае методика основана на определении наличия антител, которые служат индикатором проникновения чужеродного агента. Чтобы выявить эти «метки», биологический компонент обрабатывают ферментами.

Иммуноферментный анализ определяет антитела с точностью 96 – 98%, погрешность незначительна. Она составляет 2 – 4%.

ИФА – метод диагностики ВИЧ

ИФА анализ на ВИЧ – это первый этап диагностики. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Чтобы обнаружить вирусный белок, берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА, обрабатывают иммуноферментными реагентами. Из крови выделяют сыворотку. Если в ходе исследования обнаруживаются антитела к ВИЧ, значит, в крови уже присутствует вирус.

Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.

  • сравнительно небольшая стоимость;
  • высокая стабильность реагентов;
  • высокая чувствительность;
  • короткий срок проведения;
  • минимальное влияние человеческого фактора.

Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.

Иммуноферментный анализ не всегда дает достоверные результаты. После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока вирусы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называется «время серонегативного окна». Делать ИФА на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм. При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным.

Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:

  • через 6 недель после вероятного контакта,
  • через 3 месяца,
  • спустя полгода.

ИФА 4 поколения на ВИЧ – метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования. Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения. Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3. Если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, пациента направляют на ИФА 4 поколения.

Важно! Сразу после инфицирования человек становится заразным. Он опасен для окружающих, даже когда еще не знает о своем диагнозе!

Если при ИФА выявлены антитела к антигенам ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода – 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения. Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде. Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунный блоттинг.

Следующий этап диагностики – тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначны.

Расшифровка результатов ИФА

Время расшифровки составляет от 24 до 48 часов. Если необходимо получить информацию срочно (требуется хирургическое вмешательство), расшифровку проводят за 2 часа. В провинциальных медицинских пунктах не всегда есть необходимые реагенты. Пробу берут по месту обращения, затем ее передают в областной центр. При таких обстоятельствах итог можно узнать через 1- 2 недели.

Результат иммуноферментного анализа может быть либо положительным, либо отрицательным; других вариантов нет.

Даже если при первичном и повторных ИФА итог был положительным, пациента нельзя признать ВИЧ-инфицированным. Возможна погрешность. Причины ложноположительного результата:

  • хронические заболевания;
  • длительные инфекционные заболевания;
  • беременность.

Поэтому результат анализа должен быть уточнен дополнительными исследованиями.

Если при проведении иммуноблоттинга на ВИЧ результат положительный (реактивный), человек считается ВИЧ-инфицированным, а отрицательный тест значит, что он здоров.

Проводится еще тест на вирусную нагрузку. Этот показатель при ВИЧ характеризуется количеством вирусных частиц в единице крови (анализ определяет РНК-частицы вируса). Нормой считается количество от 5000 до 15000 клеток вируса в единице крови.

Если цифра находится в этих пределах, либо меньше, вирус неактивен. Даже в случае дальнейшего подтверждения позитивного ВИЧ-статуса человек не заметит перемен в состоянии здоровья долгое время (10 – 15 лет). Если нагрузка менее 20000 клеток, это близко к норме. Когда число вирусных клеток увеличивается, следует незамедлительно начинать противовирусную терапию.

Читайте также:  Пиелонефрит лечение антибиотиками какими у взрослых

Что делать при положительном ИФА

Отрицательный иммуноферментный анализ 3-го и 4-го поколения показывает с высокой достоверностью (98%), что человек здоров. Для подтверждения положительного ВИЧ-статуса проведения ИФА недостаточно.

Если при первом и повторных тестах в крови обнаружены антигены ВИЧ, человек получает направление на иммуноблоттинг. Когда в ходе исследований выясняется, что человек имеет ВИЧ-позитивный статус, ему следует обратиться к врачу. Он определит вирусную нагрузку и назначит терапию.

Клетки вируса со временем адаптируются к назначенным препаратам. Чтобы контролировать эффективность лечения, тест ИФА периодически повторяют.

Иногда иммуноблоттинг показывает ложноотрицательный результат. Крайне редко вирус иммунодефицита 6 месяцев (и более) не проявляет себя. Это возможно, если в кровь попало незначительное количество клеток вируса. В 0,5% от общего числа случаев диагностировать заражение удается лишь через год. В 99,5% в течение полугода после инфицирования при проведении ИФА получится достоверный результат.

Даже при проведении высокоточных исследований остается вероятность ошибки, составляющая 2%. Не следует забывать о человеческом факторе. Чтобы исключить вероятность ошибки, тест можно провести в 2-х разных учреждениях.

ИФА на сифилис является одним из самых эффективных методов, применяемых для диагностирования венерического заболевания, вызванного бледными трепонемами. Анализ позволяет определить связь антигена с антителом и осуществляется с помощью ферментов. Этот высокоточный способ выявляет инфекцию в 90% случаев. Тест-система, используемая в иммуноферментной диагностике, предназначена для обнаружения как сифилиса, так и других заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами.

Когда нужно сдавать

Анализ методом ИФА на сифилис назначается через 3-4 недели после предполагаемого инфицирования.

Часто его применяют для того, чтобы подтвердить диагноз после получения положительного результата способом, основанном на реакции Вассермана. Иммуноферментный анализ проводят, если:

  • у пациента обнаружены высыпания в области половых органов;
  • имелись случаи незащищенных сексуальных контактов;
  • женщина беременна;
  • мужчина желает стать донором семенной жидкости;
  • ребенок родился у матери, страдающей сифилисом;
  • у пациента повышена температура по неизвестной причине;
  • планируется госпитализация или оперативное вмешательство;
  • проводится медосмотр работникам детских учреждений, общепита.

Как подготовиться к сдаче анализа методом ИФА

Для того чтобы достоверность иммуноферментного анализа была максимальной, пациенты должны быть осведомлены о правилах подготовки, при несоблюдении которых результат может оказаться ложноположительным. В целях минимизирования погрешности нужно:

  1. Сдавать кровь на голодный желудок.
  2. За двое-трое суток воздержаться от употребления спиртосодержащих напитков, еды с повышенным содержанием жиров.
  3. Ограничить физические нагрузки за несколько дней до забора крови.
  4. За три часа до сдачи биоматериала отказаться от курения.
  5. Сообщить врачу о лекарственных средствах, используемых в настоящее время, а также об имеющихся заболеваниях и прививках, сделанных недавно.

О том, сколько может делаться анализ, лучше спросить работников лаборатории. Срок проведения связан не только с ее загруженностью, но и с наличием специального оборудования.

Как проводят анализ ИФА

В медицинских центрах обнаружение спирохет с применением метода иммуноферментной реакции осуществляется непрямым и прямым способом. В планшет с округлыми углублениями лаборант помещает сыворотку, выделенную из крови, забранной у пациента утром. После внесения хромогенных красящих веществ с помощью применения таблиц с цветовыми схемами, прилагаемыми в наборе для ИФА, осуществляется расшифровка теста. Таким способом работник лаборатории определяет уровни иммуноглобулинов, их число. Для того чтобы оценить исход реакции, применяется также спектрофотометр, который позволяет определить плотность биоматериала и сравнить его с контрольным образцом.

С помощью ИФА возможно выявить антитело, принадлежащее разным классам (А, G, M). При повышении уровня М-иммуноглобулинов врачи определяют время, когда произошло инфицирование бледными спирохетами. Обычно этот период не превышает 90 дней. Если у пациента увеличен титр класса А, это значит, что инфицирование произошло в течение последних 30 суток. G-иммуноглобулины позволяют выявить острый процесс, пролеченное заболевание.

Суммарный анализ, обозначаемый в медицинских центрах как “сифилис igg ИФА”, назначается людям, ранее не обследованным на это венерическое заболевание. Метод позволяет обнаружить его при появлении первых симптомов и в первоначальной стадии инфицирования.

Расшифровка результатов — нормы и отклонения

Получив на руки расшифровку, пациент не всегда может правильно истолковать ее значение. Только врач способен определить результаты и поставить точный диагноз. В лабораторном бланке могут быть указаны следующие данные:

  • IgA+ IgM- IgG- – заражение произошло недавно;
  • IgA+ IgM+ IgG- – патогенный возбудитель попал в организм менее 30 дней назад;
  • IgA+ IgM+ IgG+ – инфицирование состоялось более месяца;
  • IgA- IgM- IgG+ – венерическое заболевание пролечено.

В некоторых случаях, если результат теста положительный, врач может назначить проведение дополнительных анализов другими методами.

Точность ИФА

Способ выявления инфекционного заболевания, вызванного бледными трепонемами, считается высокочувствительным. Прозводители ИФА-тестов дают гарантию качества и подтверждение его на опытах, в ходе которых сравнивались результаты других специфических диагностик. Точность составляет 98%.

Ложноположительный результат возможен в следующих случаях:

  1. Беременность. В этот период существует вероятность получения искаженных результатов, поскольку генетические материалы отца и сам плод могут быть расценены как чужеродный агент.
  2. Хроническое заболевание. Сомнительный результат возможен, если у пациента имеется запущенная форма туберкулеза, аутоиммунные процессы, патологии печени.
  3. Недавно сделанные прививки. Вакцина оказывает влияние на синтез иммуноглобулинов.
  4. Травма. У пациента с недавними повреждениями развиваются воспалительные процессы, которые могут спровоцировать получение ложноположительного анализа.
  5. Пожилой возраст. У таких людей нередко наблюдается сразу несколько хронических патологий, оказывающих сильное влияние на иммунную систему.
  6. Новорожденные. До полутора лет у маленьких детей серодиагностика по ИФА-методу может показать положительные результаты, если женщины были инфицированы трепонемами в период беременности. В крови малыша в течение года и более циркулируют иммуноглобулины матери.
Читайте также:  Анжелика лекарство при климаксе отзывы

Цена вопроса

В зависимости от лаборатории цены на специфические тесты методом ИФА варьируются в пределах от 6,1$ до 11,4$. В некоторых диагностических центрах за процедуру взятия крови на анализ берется 2,5$.

Во многих государственных медицинских учреждениях ИФА можно сдать бесплатно. При большой загруженности лабораторий и необходимости получения быстрого результата тест на сифилис лучше сдать в частных лабораториях.

Где сдать анализ

ИФА на выявление сифилиса можно сдать в Инвитро. Стоимость услуг составляет 14$, включая забор крови в процедурном кабинете. Срок выполнения — 7 дней.

Центр CMD также предоставляет услуги по определению венерического заболевания. Стоимость анализа составляет 9,2$. Срок выполнения — до 3 дней. При необходимости лаборанты учреждения могут провести взятие крови на дому.

Пройти исследование на сифилис можно в медицинской лаборатории Гемотест. Цена анализа на сифилис РПГ (реакция пассивной гемагглютинации) составляет 10,3$. Срок выполнения — 1 сутки.

Все диагностические центры гарантируют полную анонимность.

Сифилитический тест, основанный на иммуноферментной реакции, позволяет с высокой точностью выявить венерическое заболевание, вызванное трепонемами. Анализ назначается, если неспецифический способ выявления инфекции, показывает отрицательный результат при наличии симптомов у пациента или контактах с зараженными лицами.

Лечение проводится только при наличии положительных результатов, полученных несколькими методами.

Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).

Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).

Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.

Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Преимущества метода

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

Читайте также:  Прижигание эрозии радиоволнами послеоперационный период

ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Недостатки метода

К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания к назначению и выявляемые заболевания

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

  1. Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
  • IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
  • IgG к ВИЧ;
  • Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
  • Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
  • Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
  • Ig M и IgG к токсоплазмозу;
  • Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
  • IgG к паразитарным заболеваниям;
  • Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
  • IgG к хеликобактерной инфекции.
  • Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
  • Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
  • Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).
  • Анализируемый биоматериал и особенности его забора

    Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

    Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

    Сроки готовности результатов ИФА

    При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

    Расшифровка иммуноферментного анализа

    Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

    Анализируемые показатели

    • IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
    • IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
    • IgM и IgA ( совместное присутствие ) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
    • IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

    Возможные результаты ИФА

    В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

    Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

    Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

    Не за­бы­вай­те о под­го­тов­ке к ана­ли­зу: кровь для ИФА бе­рут на­то­щак, за две не­де­ли па­ци­ен­ту же­ла­тель­но пре­кра­тить при­ем ан­ти­био­ти­ков и дру­гих про­ти­во­ви­рус­ных пре­па­ра­тов. Если че­ло­век при­ни­ма­ет ка­кие-ли­бо ле­кар­ст­ва по­сто­ян­но, нуж­но со­об­щить об этом вра­чу.

    Добавить комментарий

    ;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!:

    Adblock detector